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Aloscita133333 Gast
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Verfasst am: 12. Dez 2016 14:46 Titel: Megaprimer PCR |
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Meine Frage:
Hallo könnte mir jemand das PRinzip zur Herstellung von chimären Genen mittels Megaprimer PCR ganz simpel erklären?
Meine Ideen:
Irgendwie lese ich die ganze Zeit was dazu und blicke es dennoch nicht.
Also was ich weiß ist, dass man zweimal eine PCR macht, wobei die erste PCR einen Megaprimer ergibt ( ist dass dann die Mutation oder wie? ), welches für die zweite PCR benutzt wird als Primer...
Hilfe |
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jörg
Anmeldungsdatum: 12.12.2010 Beiträge: 2107 Wohnort: Bückeburg
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Verfasst am: 15. Dez 2016 15:32 Titel: |
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Zwei zu fusionierende Gene werden ersteinmal unabhängig voneinander amplifiziert, wobei die Besonderheit ist, dass je ein Primer einen Überhang aufweist, der Bestandteil des "anderen" Gens ist.
Dieser Teil bindet in den initialen Zyklen der 1. PCR zunächst nicht an das zu amplifizierende Gen, ist jedoch Bestandteil des amplifizierten PCR-Produktes.
Im nächsten Schritt binden dann die hergestellten Überhänge aneinader und das Gesamtprodukt wird mithilfe der beiden flankierenden Primer vervielfältigt.
Ich würde dir gerne ein Abbildung anhängen, jedoch ist irgendwie mein upload-limit erreicht, ich veruche jedoch, das zu klären... _________________ RNA?- just another nucleic acid? |
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