RegistrierenRegistrieren    LoginLogin   FAQFAQ    SuchenSuchen   
Übertragung von DNA
 
Neue Frage »
Antworten »
    Foren-Übersicht -> Genetik
Autor Nachricht
Tobse



Anmeldungsdatum: 05.05.2007
Beiträge: 93

BeitragVerfasst am: 15. März 2008 18:13    Titel: Übertragung von DNA Antworten mit Zitat

Wo setzt hier die PCR-Methode an?
1. Bevor die Restriktionsenzyme einen DNA-Abschnitt herausschneiden oder
danach?
2. Ist es auch möglich, da man ja die Nukleotidsequenz der
Restriktionsenzyme kennt, Primer synthetisch zu erstellen die nur den
Abschnitt vervielfältigen der Gesucht ist, um so nicht die gesamte DNA zu
vervielfältigen die danach mit den Restriktionsenzymen behandelt wird?
Aber gibt es da nicht Probleme mit den Sticky Ends?
pony



Anmeldungsdatum: 06.03.2008
Beiträge: 9
Wohnort: Rostock

BeitragVerfasst am: 15. März 2008 18:51    Titel: Antworten mit Zitat

also zu erstens: die PCR wird nach der Behandlung mit Restriktionsenzymen durchgeführt.
2. ist meiner Meinung nach möglich bin mir aber nicht zu 100% sicher
Tobse



Anmeldungsdatum: 05.05.2007
Beiträge: 93

BeitragVerfasst am: 15. März 2008 19:07    Titel: Antworten mit Zitat

Aber gibts da nicht Probleme mit den Sticky Ends?
Weil wenn ich die PCR start wenn die Restriktionsenzyme bereichts gewirkt haben werden diese klebrige Enden, die ja notwendig für die Übertragung der DNA sind, verschwinden.

Vor PCR (.. = gegenüber den Sticky ends)
------------..
..------------

Nach PCR
------------..
------------..

..------------
..------------
So kann ich die DNA-Abschnitte doch theoretisch gar nicht in ein Plasmid einfügen.
Bert



Anmeldungsdatum: 26.09.2007
Beiträge: 82
Wohnort: Niedersachsen

BeitragVerfasst am: 16. März 2008 00:01    Titel: Re: Übertragung von DNA Antworten mit Zitat

Tobse hat Folgendes geschrieben:
Wo setzt hier die PCR-Methode an?
1. Bevor die Restriktionsenzyme einen DNA-Abschnitt herausschneiden oder
danach?
2. Ist es auch möglich, da man ja die Nukleotidsequenz der
Restriktionsenzyme kennt, Primer synthetisch zu erstellen die nur den
Abschnitt vervielfältigen der Gesucht ist, um so nicht die gesamte DNA zu
vervielfältigen die danach mit den Restriktionsenzymen behandelt wird?
Aber gibt es da nicht Probleme mit den Sticky Ends?


1) In einer PCR kannst du nicht die gesamte (genomische) DNA amplifizieren, sondern nur einen bestimmten Abschnitt; dieser Abschnitt wird durch die Primer (Anfang/Ende) definiert, die Länge des Abschnitts ist durch die Fähigkeit der Polymerase auf einige kBp begrenzt (wenn es wirklich gut läuft, kannst du Amplifikate bis zu 20-30 kBp erreichen).
2) Ist die Template-DNA nur einige MBp lang (z.B. bakterielle DNA), so ist eine vorherige Restriktion nicht notwendig.
3) Für die spätere Klonierung kannst du in die Primer eine geeignete Restriktions-Erkennungsstelle einbauen. Nach der PCR schneidest du die Amplifikate mit dem entsprechenden Restriktionsenzym.

_________________
Holzhacken ist deshalb so beliebt, weil man bei dieser Tätigkeit den Erfolg sofort sieht. [Albert Einstein]
Tobse



Anmeldungsdatum: 05.05.2007
Beiträge: 93

BeitragVerfasst am: 16. März 2008 11:43    Titel: Antworten mit Zitat

k also doch danach
Danke
Neue Frage »
Antworten »
    Foren-Übersicht -> Genetik

Verwandte Themen - die Neuesten
 Themen   Antworten   Autor   Aufrufe   Letzter Beitrag 
Keine neuen Beiträge Wie liegt die DNA in der Zelle? 4 Linkus Finkus 31761 30. Nov 2021 17:36
Timo86 Letzten Beitrag anzeigen
Keine neuen Beiträge DNA, Antibiotika 3 MR 19749 11. Mai 2021 13:05
Bio-Gast Letzten Beitrag anzeigen
Keine neuen Beiträge Von der DNA zum Merkmal ein Begriffsnetz 0 Annanas 20777 15. Okt 2019 11:38
Annanas Letzten Beitrag anzeigen
Keine neuen Beiträge Verändert sich sich die DNA? Stammzelltransplantation 0 Gast 15267 02. Jan 2019 10:14
Anolised Letzten Beitrag anzeigen
Keine neuen Beiträge Dna Replikation - Dna Polymerase 2 Gast 15708 10. Okt 2018 10:36
Blipt1960 Letzten Beitrag anzeigen
 

Verwandte Themen - die Größten
 Themen   Antworten   Autor   Aufrufe   Letzter Beitrag 
Keine neuen Beiträge DNA/DNS 21 simsespätzle 48664 23. Nov 2005 21:51
chefin Letzten Beitrag anzeigen
Keine neuen Beiträge DNA Isolation 16 Barney 34625 04. Jan 2012 13:13
PaGe Letzten Beitrag anzeigen
Keine neuen Beiträge DNA - was kann man alles in ihr lesen ??? 16 Jens 30370 23. Aug 2005 20:26
Karon Letzten Beitrag anzeigen
Keine neuen Beiträge DNA aus Codesonne ablesen? 14 Gast 42518 09. Feb 2010 20:02
PaGe Letzten Beitrag anzeigen
Keine neuen Beiträge DNA bei roten blutkörperschen 14 FatRandy 27709 25. Nov 2008 19:47
FatRandy Letzten Beitrag anzeigen
 

Verwandte Themen - die Beliebtesten
 Themen   Antworten   Autor   Aufrufe   Letzter Beitrag 
Keine neuen Beiträge DNA in m-RNA und t-RNA umwandeln - Aufgabe 10 ketzchen 100259 16. Jan 2017 15:50
PaGe Letzten Beitrag anzeigen
Keine neuen Beiträge Unterschied zwischen RNA und DNA? 3 Cedro 59312 16. Apr 2010 19:02
PaGe Letzten Beitrag anzeigen
Keine neuen Beiträge DNA/DNS 21 simsespätzle 48664 23. Nov 2005 21:51
chefin Letzten Beitrag anzeigen
Keine neuen Beiträge Aufbau der DNA 5 Zilla 48626 08. Nov 2010 22:35
nanana Letzten Beitrag anzeigen
Keine neuen Beiträge DNA aus Codesonne ablesen? 14 Gast 42518 09. Feb 2010 20:02
PaGe Letzten Beitrag anzeigen