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Nachricht |
isa56
Gast
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 Verfasst am: 25. Jun 2014 08:58 Titel: SDS-PAGE |
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Meine Frage:
Hall!
ich habe eine SDS-PAGE durchgeführt und werte das Gel aus. wir haben verschiedenen fraktionen aufgefangen und diese dann der SDS-PAGE unterzogen. Nun ist in der letzten fraktion, in der mein Protein drin sein sollte, nicht nur ein Bande zu erkennen, wie es ja im idealfall sein sollte, sondern mehrere Banden. Was könnten das für welche sein? also eine möglichkeit wäre ja verschmutzung. und dann wurde noch irgendwas mit abbauprodukte gemeint. wie kann ich das verstehen?
Meine Ideen:
danke schon mal |
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Firelion
Anmeldungsdatum: 27.08.2009
Beiträge: 1878
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| Verfasst am: 25. Jun 2014 14:53 Titel: |
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Hi,
habt ihr danach einen Western Blot geachz oder das Gel mit Coomassie Blue bzw Poinceau S gefärbt?
LG Firelion
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It is well known that a vital ingredient of success is not knowing that what you’re attempting can’t be done - Terry Pratchett |
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isa56
Gast
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| Verfasst am: 26. Jun 2014 10:55 Titel: |
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Wir haben danach mit coomassie gefärbt und dann noch ein ELISA durchgeführt. |
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Firelion
Anmeldungsdatum: 27.08.2009
Beiträge: 1878
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| Verfasst am: 27. Jun 2014 00:27 Titel: |
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Ok,
ein ELISA auf dem Gel?
Zum Coomassie:
Dann würde ich auf Verunreiningung, unterschiedliche Isoformen oder Degradation (also teilweise zwerlegt) tippen.
Beim Westernblot würde mnoch die Möglichkeit unspezifischer Bindung des Antikörpers bestehen.
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