PCR-Fragen

missili · Anmeldungsdatum: 18.03.2017 Beiträge: 14

hallo

ich hab mal ne frage. ich sitze gerade an einem protokoll und muss folgende fragen beantworten:

wie groß waren ihre ausbeute an genomischer dna?
welche größe erwarteten und welche größe erzielten sie für ein pcr fragement?

was ich gemacht habe war folgendes:

ich habe gerstenkeimlinge mit CTAB-Extraktionspuffer homogenisiert. Die Mischung wurde anschließend bei 65 °C inkubiert und zentrifugiert. Der Überstand wurde mit einer Pipette entfernt und das DNA-Pellet wurde wurde mit Ethanol gewaschen. Es wurde wieder zentrifugiert, der Überstand wurde mit einer Pipette abgezogen und das DNA-Pellet wurde an der Luft trocknen gelassen. Anschließend erfolgte die Konzentrationsbestimmung der DNA durch die Absorption bei 260 nm.
Für die Amplifikation der DNA-Fragmente wurde die Lösung in einem Thermocylcer gestellt.

wie berechne ich aus, welche größe ich für ein pcr fragment hab? und wie berechne ich die ausbeute an genomischer dna aus?

danke =)

jörg · Anmeldungsdatum: 12.12.2010 Beiträge: 2107 Wohnort: Bückeburg