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Restriktionsnukleasen
 
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Summer11



Anmeldungsdatum: 06.04.2021
Beiträge: 29

BeitragVerfasst am: 20. Feb 2022 14:11    Titel: Restriktionsnukleasen Antworten mit Zitat

Servus smile
könnte mir bitte jemand erklären, warum man in Klonierungsexperimente am besten immer 2 Restriktionsnukleasen verwendet?

Vielen Dank im Voraus!
Bio-Gast
Gast





BeitragVerfasst am: 20. Feb 2022 16:24    Titel: Klonierung Antworten mit Zitat

Zitat:
Durch die Wahl zweier verschiedener sticky-ends-erzeugender Restriktionsenzyme bei einer Klonierung kann die Orientierung der einzufügenden DNA gesteuert werden, während bei blunt ends 50 % der Produkte einer Ligation die falsche Orientierung der eingefügten DNA zum Promotor aufweisen und daher keine Genexpression stattfinden kann. Sowohl der Vektor (meistens ein Plasmid) als auch die einzufügende DNA-Sequenz müssen dann beide Schnittstellen aufweisen und beide müssen zudem die korrekte Orientierung des Start-Codons der einzufügenden DNA-Sequenz zum Promotor ermöglichen.

aus: Restriktionsverdau(wikipedia) .
Ansonsten bitte Frage konkretisieren.

Bio-Gast.
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