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Mara Gast
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Verfasst am: 12. Sep 2005 17:04 Titel: Gensonden |
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Hallo Leute,
was sind eigentlich Gensonden und wozu braucht man die? kann da in meinem biobuch nicht wirklich eine braubchare erklärung finden.
Außerdem weiß ich nicht, welche Rolle Marker und Promoter bei rekombinanten genen spielen.
Habt ihr da ne Ahnung?
Bzw. könnt ihr mir n brauchbares buch/internetadresse geben?
Danke,
Mara |
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Nadine
Anmeldungsdatum: 23.03.2005 Beiträge: 75
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Verfasst am: 12. Sep 2005 17:56 Titel: |
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Hallo!!!
Gensonden sind mit Fluoreszenzfarbstoffen oder radioaktiven Isotopenmarkierte Oligonukleotide, die eine komplementäre Basensequenz zum gesuchten Gen aufweisen. Sie lagern sich an die passende DNA-Sequenz einer DNA an und können dort detektiert werden. Die Stabilität der Anlagerung hängt von der Übereinstimmung der DNA-Sequenzen ab. Durch intensives Waschen können alle nicht perfekt homologen Sequenzen wieder getrennt werden, um nur Signale bei exakten Übereinstimmungen zu bekommen. |
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Noctu Organisator
Anmeldungsdatum: 04.02.2005 Beiträge: 1429 Wohnort: Rheinland-Pfalz
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Verfasst am: 12. Sep 2005 19:23 Titel: |
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... und mit einem Marker-Gen überprüft man, ob auch wirklich die Transfektion gelungen ist. Beispiel ist das GFP ( Green Fluoreszent Protein ) das schleust man zusammen, auf einem DNA Stück oder Plasmid in die Zelle, wenn die dann unter UV grün leuchtet ist auch das gewünschte Gen drin. Ein ( starker ) Promotor setzt man vor ein Gen für ein gewünschtes rekombinantes Protein das man herstellen möchte. Es signalisiert/gaukelt der Zelle eine eine Wichtgkeit vor, dass sie veranlasst immer und immer wieder die Sequenz abzulesen, damit steigert man die Ausbeute. Die Promotoren kann man - glaube ich - aus Viren-DNA isolieren, die krempeln die Zellen auch so um dass die bevorzugt Virenmaterial produzieren. |
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