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Gewinnung von Plasmid-DNA
 
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Günni
Gast





BeitragVerfasst am: 07. Dez 2005 19:20    Titel: Gewinnung von Plasmid-DNA Antworten mit Zitat

hey leute ich brauche mal eure hilfe!
und zwar schreibe ich meine FA über klonierung, und jetzt hab ich eine methode die plasmiden aus der bakterie rauszumachen. ich hab die alkalische lyse. jetzt brauche ich dringend noch eine andere methode die dinger zu isolieren (hab so ne nette lererin die meint dass ich 2 brauche *grumel*)
und dann hab ich zum kompetent machen die standart methode mit calcium-dichlorid
da brauche ich auch ncoh eine andere um meine zellen willig zu machen Augenzwinkern
ich danke!!! smile
Triple F



Anmeldungsdatum: 17.11.2005
Beiträge: 31

BeitragVerfasst am: 07. Dez 2005 23:08    Titel: Antworten mit Zitat

Plasmidgewinnung erfolgt im Labor i.d.R. über Kits, die alle "Zutaten" für eine Aufreinigung enthalten (Firmen: Qiagen,InvitroGen,..). Dabei werden die Zellen alkalisch aufgeschlossen und Proteine und Zelltrümmer abgetrennt.


Qiagen Manual:
http://www1.qiagen.com/literature/handbooks/PDF/PlasmidDNAPurification/PLS_QP_Miniprep/1030984_HB_QIAprepMiniprep_062005.pdf
So in der Mitte steht das "Procedure", drum herum noch ein paar facts

Hier noch ein Protokoll ohne Kit:
http://sosnick.uchicago.edu/DNA_miniprep.html

Kann Dir morgen noch ein kurzes Protokoll für "schmutzige Minis" liefern...

_________________
like drinking poison.
like eating glass.

bloc party.
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