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mausi1 Gast
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Verfasst am: 05. Okt 2013 22:15 Titel: Biochemie: Berechnung der Verdünnung für Aktivitätsbestimmun |
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Meine Frage:
Hallo! ich hätte eine Frage zu einer biochemischen Rechnung:
Sie haben den Rohextrakt einer LDH-Isolierung 1/200 verdünnt und bei der Aktivitätsbestimmung der LDH ein dE/min von 0,073/min erhalten.
Nun haben Sie 1450ml des Rohextraktes mit DEAE-Cellulose versetzt und die LDH binden lassen. Sie haben die schwach gebundenen Proteine eluiert und diese Fraktion von 910ml hat bei einer 1/10 Verdünnung ein dE/dt von 0,054/min ergeben.
Die erste Desorption der LDH wird nun mit 250ml Puffer durchgeführt, und Sie können davon ausgehen, dass etwa 80% der gebundenen Aktivität eluiert werden. Wie müssen Sie nun verdünnen, um ein dE/dt von 0,05/min zu erhalten?
Meine Ideen:
Ich habe leider keinen eigenen Ansatz für diese Rechnung.
Ich wollte es zuerst mit dem Lambert Beer'schen Gesetz berechnen, jedoch habe ich dafür keinen molaren Extinktionskoeffizient.
Wenn ich 2 Gleichungen des Lambert Beer'schen Gesetz aufgestellt hätte, hätten sich die Konzentration und der molare Extinktionskoeffizient rausgekürzt.
Ich bin ziemlich verzweifelt und hoffe jemand kann mir vl einen Denkanstoß geben.
Vielen Dank im Voraus. |
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Firelion
Anmeldungsdatum: 27.08.2009 Beiträge: 1878
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Verfasst am: 06. Okt 2013 00:23 Titel: |
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Hi,
intuitiv würde ich erstmal 200* 0,073 rechnen um die Gesamtaktivität zu bekommen.
Dann 10* 0,054 um die verlorene Aktivität zu bestimmen.
Dann die Differenz aus Gesamtaktivität - verlorene aktivität * 0,8 um den anteil der eluierten Aktivität zu bekommen.
Eluierte Aktivität : x = 0,05.
Das nach x auflösen.
Das wären meine ersten gedanken. Was mit den Volumina ist weiß ich im Moment gerade nicht.
LG Firelion _________________ It is well known that a vital ingredient of success is not knowing that what you’re attempting can’t be done - Terry Pratchett |
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mausi1 Gast
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Verfasst am: 06. Okt 2013 11:31 Titel: |
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AAh ok danke, ich war bei der Rechnung wohl zu fixiert auf Formeln.
Vielleicht sind die angegebenen Volumina vernachlässigbar, da ich ja ohnehin bei der Messung in der Küvette dieselbe Menge habe, ob beim Rohextrakt oder den eluierten Proteinen.
Vielen Dank schonmal!
Lg |
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