jörg
Anmeldungsdatum: 12.12.2010
Beiträge: 2107
Wohnort: Bückeburg
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 Verfasst am: 30. Okt 2011 13:39 Titel: Re: Phage-Display |
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| kathy78 hat Folgendes geschrieben: | | es es soll irgendwie ein fusionprotein gebildet werden. (?) |
Es wird ein Fusionsprotein aus der in die Phagenhülle eingebauten Domäne des pIII (von dir Gen3 bezeichnet), also eines verkürzten Proteins und des "gene of interest" (hier hGH) generiert. Der Grund ist, dass das Wachstumshormon allein nicht in die Phagenhülle eingebaut würde und somit nicht geschaut werden kann, welche Isoform am besten an den Rezeptor bindet.
Eine Cotransformation mit einem Cophagen ist wichtig, damit das pIII auch noch in voller Länge vorhanden ist, so dass die Phagen auch noch an E. coli andocken können und diese infizieren, damit die geeigneteste Isoform rekombinant von den Bakterien hergestellt werden kann.
Liesse man also die Helferphagen weg, so könnte zwar geschaut werden, welche Isoform am besten an den Rezeptor bindet, aber man könnte sie nachher nicht in grossen Mengen von Bakterien synthetisieren lassen, da ja das "Andockprotein" pIII fehlte bzw. nur als Fusionsprotein vorliegt, bei dem die entsprechende Domäne durch das zu untersuchende Peptid/Protein ersetzt ist.
Hier auch mal eine Publikation dazu:
http://bfg.oxfordjournals.org/content/1/2/189.full.pdf
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RNA?- just another nucleic acid? |
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