Transposon Mutagenese

Pisum · Anmeldungsdatum: 11.02.2014 Beiträge: 1

Meine Frage:
Hallo,

kann mir jemand erklären, was eine Transposon-Shuttel-Mutagenese ist, und was der unterschied zu einer normalen Transposon Mutagenese ist?

Meine Ideen:
Meine Überlegung war, das ein Transposon in ein Gen springt, und es deaktiviert. Aber wie sich shuttle und normale Transposonmutagenese unterscheiden weiß ich leider nicht.

jörg · Anmeldungsdatum: 12.12.2010 Beiträge: 2107 Wohnort: Bückeburg

Zunächst handelt es sich bei der Transposon-Mutagenese um eine molekularbiologische Technik, die zu der Art der Zufallsmutagenese gehört:
Auf einem Plasmid, das replikationsdefizient ist (duch einen defekten ORI), liegt ein transposables Element, welches in das Bakterienchromosom zufällig durch Rekombinationsereignisse inseriert. Die zugehörige Rekombinase (in diesem Fall eine Transposase) befindet sich dabei ausserhalb der Transpson-Sequenz.
Durch die zufällige Insertion irgendwo im Genom kann man nun Gene mit bestimmten Eigenschaften lokalisieren und ihre Eigenschaften charakterisieren, weil ja durch die Insertion das Genprodukt nicht mehr funktionsfähig ist bzw. das Gen selbst dysreguliert.

Die shuttle-Mutagenese erlaubt jetzt die Untersuchung von Hefe-Genen, die in transformierbaren Organismen rekombiniert werden und dann das rekombinierte Gen zurück in die Hefe gebracht wird.