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kompetitve ELISA
 
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denny38
Gast





BeitragVerfasst am: 29. Aug 2011 19:46    Titel: kompetitve ELISA Antworten mit Zitat

Meine Frage:
Hi ich braich da dringend hilfe!

und zwar: ein monoklonaler antikörper funktioniert gut im western blot aber nicht im kompetitiven ELISA für das gelöste Antigen. woran könnte das liegen?
das versteh ich nicht. dabei wird doch ein monoklonler antikörper eingesetzt!

welches epitop(koninierlichen, diskontinuierliches) lässt sich leicht als peptid nachsynthetisieren?

Meine Ideen:
waäre euch wirklich dankbar für antworten! ich sitz schon seit stunden dran!
jörg



Anmeldungsdatum: 12.12.2010
Beiträge: 2107
Wohnort: Bückeburg

BeitragVerfasst am: 30. Aug 2011 19:36    Titel: Antworten mit Zitat

Ich bin mir nicht sicher, ob ich dein Problem richtig verstehe.

Wie hast du den Antikörper denn auf der Microtiterplatte fixiert?
Woran erkennst du, dass er nicht funktioniert?- vielleicht ist in deinen Proben auch einfach so wenig Antigen, dass die Abweichung zu "unbesetzten" Platten so minimal ist, dass kein signifikanter Unterschied zur Referenz gemessen werden kann?
Wie hast du die Proben aufgearbeitet?
Erkennt der Antikörper denn dein Antigenkonjugat oder ist da gar nichts zu sehen?
Bist du dir sicher, dass es sich nicht um einen technischen Fehler handelt, sondern, dass der Antikörper nicht funktioniert?

denny38 hat Folgendes geschrieben:

welches epitop(koninierlichen, diskontinuierliches) lässt sich leicht als peptid nachsynthetisieren?


Was zeichnet denn ein kontinuierliches bzw. diskontinuierliches Epitop aus?
Auf der Ebene welcher Proteinstrukturen (Primär-, Sekundär-, oder Tertiärstruktur) sind denn die kontinuierlichen und diskontinuierlichen Epitope nachzuweisen?
Wenn du diese Fragen beantwortest, müsstest du auf die Antwort deiner Frage eigentlich selbst kommen.

Erkennt dein Antikörper allerdings ein diskontinuierliches Epitop, wundert mich eigentlich, dass er im Western- Blot überhaupt funktioniert; damit dürfte sich diese Frage in dem Zusammenhang eigentlich gar nicht stellen.

_________________
RNA?- just another nucleic acid?
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