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Zellaufschluss
 
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Nubi



Anmeldungsdatum: 19.06.2015
Beiträge: 1

BeitragVerfasst am: 19. Jun 2015 14:20    Titel: Zellaufschluss Antworten mit Zitat

Meine Frage:
Hallo,

ich habe in einem Praktikum E. coli Zellen per Frenchpress aufgeschlossen, um ein überexprimiertes Protein zu isolieren.

Der Aufschlusspuffer bestand aus Tris (50 mM), EDTA (1 mM), und Glucose (50 mM)

meine Frage: wozu dienen die jeweiligen Pufferbestandteile?

Vielen Dank schonmal für die Hilfe :)

Meine Ideen:
TRIS dient wohl als Puffersubstanz bei pH zwischen 7 - 9

EDTA komplexiert zweiwertige Mg- und Ca-Ionen (aber warum ist das notwendig)

Bei der Glucose habe ich gar keine Ahnung wozu die dient -.-
Firelion



Anmeldungsdatum: 27.08.2009
Beiträge: 1878

BeitragVerfasst am: 19. Jun 2015 16:10    Titel: Antworten mit Zitat

Hi,

EDTA hemmt mE einige Proteasen.

Die Glukose könnte eventuell dem osmotisdchen Aufschluss dienen.


LG Firelion

_________________
It is well known that a vital ingredient of success is not knowing that what you’re attempting can’t be done - Terry Pratchett
Nubi1
Gast





BeitragVerfasst am: 19. Jun 2015 17:42    Titel: Antworten mit Zitat

vieln Dank!
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