Berechnung Transformationsrate???

eva · Anmeldungsdatum: 09.03.2006 Beiträge: 4

Hallo, wer kann mir helfen: Wie Berechne ich die Transformationsrate:

Ein genetisches Transformatinos-Experiment wird durchgeführt. Von einer Plasmid-Präparation mit der Konzentration von 1µg/µl werden 2µl einer 1/100 Verdünnung in einer Transformationsreaktion eingesetzt. Nach der Transformation wird das Volumen der Reaktion auf 1ml mit L-Medium aufgefüllt. Nach der folgenden Inkubation bei 37°C werden 100µl ausplattiert und über Nacht bei 37°C bebrütet. Am nächsten Tag sind auf der Platte 350 Kolonien zu zählen.
Berechnen Sie die Transfotmationsrate von diesem Experiment.

Triple F · Anmeldungsdatum: 17.11.2005 Beiträge: 31

c (Mini-Präp): 1 µg/µl
c (Mini-Präp 1:100): 0,01 µg/µl
--> davon 2µl = 0,02µg DNA

Auf 1ml auffüllen: 0,02µg in 1000µl

100µl ausplattieren --> 0,002µg --> 350 Kolonien

Die Frage ist jetzt nur, wie die Trafo-Rate für dieses Experiment definiert ist. Transformierte Zellen pro µg DNA (Dreisatz-Rechnung)?

Bei uns wird die Trafo-Rate anhand der eingesetzten (Pflanzen)zellen berechnet, DNA liegt idR im Überschuss vor --> transformiert / nicht-transformiert.