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Megaprimer PCR
 
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Aloscita133333
Gast





BeitragVerfasst am: 12. Dez 2016 14:46    Titel: Megaprimer PCR Antworten mit Zitat

Meine Frage:
Hallo könnte mir jemand das PRinzip zur Herstellung von chimären Genen mittels Megaprimer PCR ganz simpel erklären?

Meine Ideen:
Irgendwie lese ich die ganze Zeit was dazu und blicke es dennoch nicht.

Also was ich weiß ist, dass man zweimal eine PCR macht, wobei die erste PCR einen Megaprimer ergibt ( ist dass dann die Mutation oder wie? ), welches für die zweite PCR benutzt wird als Primer...

Hilfe unglücklich
jörg



Anmeldungsdatum: 12.12.2010
Beiträge: 2109
Wohnort: Bückeburg

BeitragVerfasst am: 15. Dez 2016 15:32    Titel: Antworten mit Zitat

Zwei zu fusionierende Gene werden ersteinmal unabhängig voneinander amplifiziert, wobei die Besonderheit ist, dass je ein Primer einen Überhang aufweist, der Bestandteil des "anderen" Gens ist.
Dieser Teil bindet in den initialen Zyklen der 1. PCR zunächst nicht an das zu amplifizierende Gen, ist jedoch Bestandteil des amplifizierten PCR-Produktes.
Im nächsten Schritt binden dann die hergestellten Überhänge aneinader und das Gesamtprodukt wird mithilfe der beiden flankierenden Primer vervielfältigt.

Ich würde dir gerne ein Abbildung anhängen, jedoch ist irgendwie mein upload-limit erreicht, ich veruche jedoch, das zu klären...

_________________
RNA?- just another nucleic acid?
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