p16INK4a Gast
|
Verfasst am: 29. Sep 2004 23:42 Titel: Re: Gene identifizieren mit Hilfe von Puffs?? |
|
|
Anonymous hat Folgendes geschrieben: | Hi,
Ich würde gerne wissen wie man Gene identifizieren kann mit Hilfe von Puffs in Riesenchromosomen? wäre nett wenn mir jemand weiterhelfen könnte
lg
Vale |
Was ist im konkreten Fall damit gemeint? Sollen bekannte oder unbekannte Gene identifiziert bzw. zugeordnet werden?
Es wäre möglich, mittels des P-Transposons bei Drosophila melanogaster im Rahmen einer "gene targeting"-Methode Mutanten zu isolieren, bei denen im Vergleich zum Wildtyp Puffs neu gebildet werden oder verschwinden. Weist man die P-Transposon-Sequenzen mit Hilfe der fluoreszenzmikroskopischen FISH-Technik (= fluorescence in situ hybridization") nach, so kann man beweisen, dass das Transposon im Bereich des neuen Puffs oder auch des ehemaligen transkriptional aktiven Bereiches inserierte. Anschließend könnte der Versuch unternommen werden, die Sequenzabschnitte um die Insertionsstelle des P-Transposons herum zu klonieren, vorzugsweise mittels PCR cloning-Methoden.
In Zeiten der Prä-Genomära, als das Genom von D. melanogaster noch nicht vollständig sequenziert, indes dicht genug mit genetischen Markern kartiert worden war, dürfte ebenso ein anschließendes "chromosome walking" dienlich sein. |
|