Isolierung von Lysozym aus Hühnereiweiß

Nixe · Anmeldungsdatum: 13.01.2007 Beiträge: 12

DANKE !

PaGe · Moderator Anmeldungsdatum: 19.03.2007 Beiträge: 3549 Wohnort: Hannover

Ohne den Versuch zu kennen, kann ich dir das Prinzip einer Säulenaufreinigung erklären.

Auf eine vorbereitete Säule gibst du deine Probe und das Protein bindet and das Säulenmaterial. Mit wenig bis keinem Salz bleibt es gebunden und du kannst Sachen die nicht richtig an das Säulenmaterial binden auswaschen. Wenn du die Salzkonzentration etwas erhöhst (man wird die optimale Konz. durch Tests ermittelt haben), kannst du dein Protein ablösen. Viele andere Proteine bleiben aber am Material hängen, da sie eine sehr feste Bindung zum Material besitzen. In der 2. Fraktion müsste demnach dein Protein sein. Es kann aber auch sein, dass dies noch ein zusätzlicher Waschschritt ist.
Der letzte Schritt sollte dann eine derart hohe Konzentration das sämtliche Proteine abgelöst werden müssten. Dadurch ist die Säule auch wieder rein und kann für eine weitere Aufreinigung vorbereitet werden.

M!cha · Anmeldungsdatum: 22.12.2006 Beiträge: 52

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