Unterschied Gelektrophorese und PCR

kikiriki · Anmeldungsdatum: 12.03.2011 Beiträge: 3

Meine Frage:
Hey Leute,
eine Frage, was ist der grobe Unterschied zwischen Gelektrophorese und PCR? Dass man bei der PCR weniger DNA braucht? Und warum verwendet man bei PCR DNA-Abschnitte, die keine Informationen enthalten? Was soll das denn bringen? Und was genau sind diese STR?

Meine Ideen:
noch eine blöde Frage: bei der Proteinbiosynthese entstehen Merkmale..ich hab wie das abläuft und so weiter, aber wo bleibt danach diese Polepetidkette? Etwa im Cytoplasma? Ein Merkmal ist für mit Genen verbunden und Gene befinden sich doch an der DNA, also im Zellkern..

würde mich freunden, wenn einer antwortet..

Jaamar · Anmeldungsdatum: 14.06.2010 Beiträge: 119

ui, mal schauen ob wir da ein bissl ordnung rein bekommen :-)

chefin · Organisator Anmeldungsdatum: 28.04.2004 Beiträge: 1549 Wohnort: Oberhausen

kikiriki · Anmeldungsdatum: 12.03.2011 Beiträge: 3

Also wir haben im Heft aufgeschrieben, dass man bei der PCR ausschließlich mit STR-Genen arbeitet. Das sind Gene, die keine Merkmalseigenschaften der Person enthalten und auf den Introns liegen. Sind diese Gene denn bei jeder Person unterschiedlich, obwohl sie keine Merkmalseigenschaften enthalten? Sonst würde es doch kein Sinn machen sie zu verwenden, wenn sie bei jeder Person gleich wären um z. B. die Vaterschaft nachzuweisen??

Und außerdem haben wir aufgeschrieben RFLP( Restrictions Fragment Längen Polymorphismus) sei die ältere Methode, genetische Fingerabdrücke zu erstellen , dafür sind große Mengen an DNA erforderlich. Und bei dieser Methode ist die Gelektrophorese erklärt also dient sie auch dazu genetische Fingerabdrücke zu erstellen?
Benutzt man bei der Gelektrophorese auch STR-Gene??

jörg · Anmeldungsdatum: 12.12.2010 Beiträge: 2107 Wohnort: Bückeburg

Eine PCR kann prinzipiell zur Verfielfältigung (Amplifikation) jedes beliebigen DNA- Abschnittes durchgeführt werden.

Bei dem "genetischen Fingerabdruck" bedient man sich allerdings sog. "Tandem- Sequenzen" (also sich ständig wiederholender Sequenzen), zu denen auch die "short- tandem- repeats" (STR) gehören. Neben diesen werden für den genetischen Fingerabdruck aber auch sog. "microsattelliten- varial- number- tandem- repeats" (VNTR) genutzt.
Der Unterschied besteht u.a. in der Länge dieser Sequenzen (STR: 2-7 Basenpaare; VNTR: 10- 150 Basenpaare).
Die PCR- amplifizierten DNA- Abschnitte können dann mittels einer Gelelektrophorese "aufgetrennt" werden. Die Wahrscheinlichkeit, dass zwei Individuen, die nicht miteinánder verwandt sind, die gleiche Anzahl an Wiederholungen aufweisen, ist äusserst gering.
Es lässt sich damit allerdings prinzipiell keine Aussage über phänotypische Eigenschaften fällen, da die meisten dieser Tandem- Sequenzen in nicht- codierenden Bereichen liegen.
Da die DNA hier vervielfältigt wird, braucht man tatsächlich nur geringe Mengen.

Anders bei der Restriktionsframent- Längen- Analyse. Hier braucht man mehr DNA, weil ja keine Vervielfältigungsreaktion stattfindet und zu geringe Mengen DNA auf dem Elektrophorese-Gel nicht sichtbar gemacht werden können.
Prinzipiell basieren die Längenpolymorphismen auf der Häufigkeit, mit der gewisse Schnittstellen auf einem Chromosom vorkommen. Verschiedene Individuen haben nämlich mit hoher Wahrscheinlichkeit unterschiedlich viele Schnittstellen für ein bestimmtes Restriktionsenzym.
Restriktionsenzyme schneiden dabei i.d.R. in den intronischen Sequenzen.

Eine direkte Darstellung der Längen einzelner Tandem- Sequenzen erfolgt aber nicht, obwohl auch diese Einfluss auf die Längen der geschnittenen DNA- Fragmente nehmen (ist hier aber nicht so bedeutend wie die Anzahl der Schnittstellen).
Das Prinzip der Gelelektrophorese ist dabei eigentlich Bestandteil beider Analyseverfahren. Dabei werden die DNA- Fragmente in einem elektrischen Feld ihrer Länge nach aufgetrennt.

Also:
1.Methode (RFLP): Verdau mit Restriktionsenzymen, dann Gel zum "Längenvergleich"
2. Methode : PCR- Amplifikation bestimmter Sequenzen, dann Gel zum "Längenvergleich"