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CineX



Anmeldungsdatum: 03.03.2010
Beiträge: 10

BeitragVerfasst am: 17. Jan 2013 21:23    Titel: DNA Reparatur - Frage Antworten mit Zitat

Hallo zusammen,

jetzt habe ich nochmal eine kurze Frage. Smile Ist vielleicht eine dämliche Frage, aber gibt es Reparaturprozesse bei denen die DNA einer umliegenden "Nachbarzelle" zur Korrektur benutzt wird? Hintergrund der Frage ist folgender: Habe versucht mehr über die Strahlenresistenz von Deinococcus radiodurans herauszufinden und dabei auf folgende Textstelle gestoßen:

Zitat:
"Dies liegt wahrscheinlich daran, dass DNA-Schäden durch die intakten Chromosome der Nachbarzellen mittels
homologer Rekombination repariert werden."


Quelle: http://www.univie.ac.at/stv-biologie/HP/downloads/BOE/Oekophysio-ZF-sose10.pdf

Daher stelle ich mir die Frage ob es denn Reparatursysteme gibt welche andere Zellen als "Vorlage" nutzen? Durch die höhe Strahlenresistenz des Bakteriums wäre es ja denkbar...
Firelion



Anmeldungsdatum: 27.08.2009
Beiträge: 1878

BeitragVerfasst am: 17. Jan 2013 22:04    Titel: Antworten mit Zitat

Hi,

zumindest bei Menschen geht das nicht.
Bakterien sind allerdings in der Lage DNA aufzunehmen. Dies geht mit nackter DNA passieren (Transfektion) odervon Bakterium zu Bakterium ( Konjugation und Transposons). Zumindest die Transposons können an unterschiedlicher Stelle ins Genom integrieren.
Ob Bakterien, dies jede gezielt zur reparatur von Strangbrüchen einsetzen können, weiß ich nicht.

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jörg



Anmeldungsdatum: 12.12.2010
Beiträge: 2107
Wohnort: Bückeburg

BeitragVerfasst am: 17. Jan 2013 23:06    Titel: Antworten mit Zitat

Firelion hat Folgendes geschrieben:
zumindest bei Menschen geht das nicht.


Auch beim Menschen gibt es homologe Rekombinationsereignisse. Das wohl verbreiteteste Beispiel ist das "crossing-over" in der Keimzellentstehung. Aber auch transposable Elemente spielen eine Rolle und wenn man intakte, nicht fragmentierte DNA (also z.B. Plasmide) in den Zellkern bringt, können diese auch chromosomal inserieren, also stabil ins Genom aufgenommen werden, wenn auch nur mit einer geringen Wahrscheinlichkeit. Auch hier sind Reparaturenzyme im weiteren Sinne dafür verantwortlich. Ferner kann eine Zellinie mittels z.B. Rekombinasen auch durch homologe Rekombination zur Inegration von Fremd-DNA gebracht werden.

Das Problem bei den meisten Säugetierzellen ist aber, dass DNA mit freien Enden eine Apoptose induzieren, da der Verlust der Chromosomenintegrität auch mit dem Vorkommen von linearen DNA-Fragmenten assoziiert ist. Also bildlich gesprochen: Die Zelle "denkt", dass ihre Chromosomen zerschreddert sind und "begeht Selbstmord". Deswegen wäre das mit den DNA-Fragmenten von Nachbarzellen ein Problem. Ausserdem verdauen phagozytosekompetente Zellen - und das müssen nicht einmal professionalisierte Phagozyten sein, Fibroblasten z.B. können das auch - freie DNA von zerstörten Zellen.

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RNA?- just another nucleic acid?
Firelion



Anmeldungsdatum: 27.08.2009
Beiträge: 1878

BeitragVerfasst am: 17. Jan 2013 23:12    Titel: Antworten mit Zitat

Ich dachte die Reparaturmechanismen beim Menschen beziehen sich auf die Schwesterchromatide der selben Zelle und nicht auf den Austausch zweier Nachbarzellen.

Werden deswegen für Säugerzellen primär Viren als Vektoren benutzt und nicht wie bei Bakterien und Hefen(?) nur die Plasmide benutzt?

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jörg



Anmeldungsdatum: 12.12.2010
Beiträge: 2107
Wohnort: Bückeburg

BeitragVerfasst am: 17. Jan 2013 23:26    Titel: Antworten mit Zitat

Firelion hat Folgendes geschrieben:
Ich dachte die Reparaturmechanismen beim Menschen beziehen sich auf die Schwesterchromatide der selben Zelle und nicht auf den Austausch zweier Nachbarzellen.


Na klar, das habe ich auch lediglich angeführt, um erstmal mit einem Rekombinationsereignis zu beginnen, das bekannt ist.

Firelion hat Folgendes geschrieben:
Werden deswegen für Säugerzellen primär Viren als Vektoren benutzt und nicht wie bei Bakterien und Hefen(?) nur die Plasmide benutzt?


Du kannst auch mit Plasmiden stabile Zellinien generieren. Die Effizienz ist nicht so hoch wie bei einer Transduktion, wenn du aber einen Selektionsmarker auf das Plasmid klonierst (z.B. Neomycin-Resistenz), kannst du die Zellklone, die integriert haben, selektionieren und weiter kultivieren. Mit viralen Vektoren ist die Effizienz besser, aber es ist auch umständlicher (du benötigst eine Produzentenzelllinie, die dir erstmal deine Vektoren produziert, dann musst du die Viren aus dem Überstand ernten, entsprechend konzentrieren, eine Zielzellinie transduzieren und nachher selektionieren) und die Sicherheitsbestimmungen sind enger. Transfektionen mit Plasmid-DNA darf man im S1-Bereich ohne besondere Anträge durchführen.

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