osmolatität und ph wert in der zellkultur

katja · Gast

hi
ich hab folgende frage:
welchen einfluss hat die osmolalität in zellkulturmedien auf den ph wert?

Noctu

hast Du evt. noch ein paar nähere Info zur Aufgabenstellung ?

Prinzipiell stellt man die Osmolarität eines Mediums so ein dass es physiologisch ist. Ist so um 300mOsmol. pH-akive Ionen sind auch so konzentriert wie im Organismus, betrifft vor allem PO4, HPO4, und H2PO4.
Der Brutschrank wird mit 5% CO2 begast , damit stellt sich ein pH-Wert so bei 7,2 ein, durch Bicarbonat im Medium als Puffersystem. Ein Indikator ( Phenolrot ) im Medium zeigt ob der pH ok ist. Wenn die Zellen das Medium verbraucht haben wird es gelb, wg. saueren Stoffwechselprodukten. Also wenn das Medium physiologisch ist hat die Osmol. am pH-wert nix schrauben. ist es zu konz. oder zu verdünnt gehen die Zellen ein. dann passiert auch nix.

katja · Gast

danke schonmal
also ich mache einen screening versuch mit hybridomazellen und lasse sie bei verschiedenen osmolalitäten wachsen (290-360mosm/kg). und hab halt überlegt ob sich bei höheren osmolalitäten der ph verändert....?!
viele grüße

Noctu

dann ists klar . Der pH ändert sich dann nicht.
Was für ein Medium nimmst Du ? Nehme an RPMI 1640, wenn Du den Zellen was Gutes tun willst, gib mal 10% MEM-alpha dazu, das ist reichhaltiger und bietet noch Nucleotide.
Falls Du mit Serum arbeitst dann gibts noch ein Trick wenn die mal nicht so wollen: Wenn Du FCS auftaust, dann im Kühlschrank, wenn getaut, die obere Phase abnehmen, dann wie immer hitzeinaktivieren. Die obere hat oft einen stark stimulierenden Effekt.