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bella20
Gast
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 Verfasst am: 23. Aug 2011 20:24 Titel: biotechnologie |
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Meine Frage:
Hi! Ich hab da mal ne frage bei der ich nicht weiter komme:
Warum muss bei der Produktion rekombinanter proteine in bakterien immer eine induktion der proteinexpression erfolgen? Wann erfolgt diese? Warum ist dies bei säugerzellkuluren nicht erforderlich?
Beispiele für proteine die im großmaßstab mit hilfe von bakteriellen Kulturen produziert werden!
Meine Ideen:
bei frage 1 hat das vllt was damit zu tun dass bakterien keine glykolysierung haben?
ich wäre euch wirklich dankbar für hilfe!!!! |
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Jaamar
Anmeldungsdatum: 14.06.2010
Beiträge: 119
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| Verfasst am: 23. Aug 2011 20:33 Titel: |
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also zu 1.: nein, da liegst du falsch. man kann aufgrund der glykolysierungen und disulfid-brücken manche proteine in bakterien einfach nicht richtig herstellen.
warum es einer induktion bedarf, hat einen anderen grund. es handelt sich meist um sehr starke promotoren, die den restlichen stoffwechsel der zelle negativ beeinflussen. am anfang ist dies hinderlich, da man die bakterien ja erst vermehren muss (was nur schlecht, oder garnicht funktionieren würde).
diese erfolgt dann, wenn die bakteriendichte hoch genug ist.
ob und warum das bei säugetierzellen nicht erforderlich ist, weiß ich nicht. würde mich wundern, wenn dort keine induktion notwendig sein sollte.
ein beispiel: insulin
beste grüße |
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Jaamar
Anmeldungsdatum: 14.06.2010
Beiträge: 119
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bella20
Gast
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| Verfasst am: 23. Aug 2011 21:36 Titel: |
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also so ganz versteh ich das nicht. kannst du das vllt nochmal in anderen worten erklären?  |
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Jaamar
Anmeldungsdatum: 14.06.2010
Beiträge: 119
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| Verfasst am: 23. Aug 2011 22:16 Titel: Re: biotechnologie |
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| bella20 hat Folgendes geschrieben: |
Warum muss bei der Produktion rekombinanter proteine in bakterien immer eine induktion der proteinexpression erfolgen? |
zellen brauchen zum wachsen energie, aminosäuren usw.
das rekombinante protein befindet sich auf einem plasmid mit starkem promotor. ein starker promotor hat eine sehr hohe affinität zur rna-polymerase. das bedeutet, wenn der offen ist, dann konzentriert sich die rna-polymerase auf das plasmid, was zu einer hohen expression des proteins führt.
ABER am anfang fängt man mit wenigen zellen an. diese sollen sich erstmal richtig vermehren. wäre nun das plasmid ganz offen (meist kann man es nicht 100% verschließen), würde das die zelle am wachsen hindern. das ist in etwa so, als würdest du beim wandern anstelle einer jacke einen backofen den berg rauf schleppen.
also verschließt man eben diesen promotor. und dieser verschluss wird mit einem indikator geöffnet, wodurch die expression des rekombinanten proteins eingeleitet.
| bella20 hat Folgendes geschrieben: |
Wann erfolgt diese? |
wenn die gewünschte zelldichte erreicht ist
| bella20 hat Folgendes geschrieben: |
Warum ist dies bei säugerzellkuluren nicht erforderlich? |
ich denke, dass eine indikation sehr wohl notwendig ist (siehe oben). als beispiel hab ich eine zelllinie von invitrogene angeführt.
| bella20 hat Folgendes geschrieben: |
Beispiele für proteine die im großmaßstab mit hilfe von bakteriellen Kulturen produziert werden! |
Insulin
hoffe es ist etwas besser :-) |
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