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emulsion pcr
 
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lilly45
Gast





BeitragVerfasst am: 09. Jan 2012 21:40    Titel: emulsion pcr Antworten mit Zitat

Meine Frage:
Hi! wie kann ich mir die emulsion pcr vorstellen?
Also es ist ja so dass die dna erstmal in fragmente zerlegt wird. dann werden adapter ligiert (WARUM?). und durch denaturierung wird die ds-DNA in ssDNA zerlegt. die fragmente werden anschließend an beads gebunden (WIE?). die mit dna versehenen beads werden in tröpfchen der emulsion gegeben (=Kompartimente). aber wie eerfolgt die PCR in den tröpfchen? irgendwie kann ich mir das nicht richtig vorstellen. dienen die adapter als primer? und wie sind die amplifizierten produkte dann später an den beads gebunden? weil eigentlich sind sie das doch nicht nach der amplifikation oder?

Meine Ideen:
hoffe jemand kann mir helfen. danke
jörg



Anmeldungsdatum: 12.12.2010
Beiträge: 2107
Wohnort: Bückeburg

BeitragVerfasst am: 10. Jan 2012 19:30    Titel: Re: emulsion pcr Antworten mit Zitat

lilly45 hat Folgendes geschrieben:
dann werden adapter ligiert (WARUM?).


Damit sie an die "beads" (das sind kleine Kügelchen, an die dann spezifisch eine bestimmte Sequenz bindet) binden können.
Diese beads haben also Sequenzen, die komplementär-revers zu den Adaptoren sind und dienen damit als Primer ("primer-coated-beads" könnte man sie also nennen oder auf deutsch: "Oligonukleotid-bestückte kleine Kügelchen").
Über diese Sequenzen, die ein fester Bestandteil dieser "Kügelchen" ist, bleibt die DNA dann auch an den beads gebunden.

_________________
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